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湘雅三医院检验科引进湖南省首台微生物鉴定质谱仪

党总支: 科室:检验科 作者:曹宇星 谢卓 时间:2015/10/31 22:15:16 点击数:
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10月,湘雅三医院检验科为优化检验技术以满足临床及患者的需求,引进湖南省首台德国Bruker Microflex MALDI-TOF质谱仪。

该质谱仪目前主要应用于微生物鉴定的检测。已知的传统微生物鉴定方法用时长达3至5天,而Microflex MALDI-TOF质谱仪对微生物作出鉴定仅需2小时。质谱仪对所有微生物类型还能达到高于90%的鉴定准确度,成为微生物鉴定技术中的“金标准”。另外,Microflex MALDI-TOF质谱仪的数据库中有超过五千种的细菌,使之更能对一些罕见细菌作出鉴定。质谱技术相较传统鉴定技术更具有样品用量少,分离与鉴定同时进行,重复性好及高通量的特点。目前检验科质谱仪微生物鉴定检测项目收费仍维持常规鉴定的价格。

Microflex MALDI-TOF质谱仪的工作原理是什么呢?该质谱仪离子源中的样品,首先在极高的真空状态下,在激光照射作用下,将物质气化、电离成正离子束,经电压加速和聚焦导入质量分析器中,利用离子在无场漂移管中的飞行时间测量离子质荷比(m/z),并按其大小顺序进行收集和记录,得到质谱图。最后通过工作站软件计算样品质谱图与参考数据库中已知菌株质谱图模式特征的相似性来分析鉴定。

MALDI-TOF质谱技术可以对微生物的多种成分进行分析,包括蛋白质、多肽、脂类、脂多糖(LPS)和DNA分子。该技术包括了以下临床应用:(1)通过每种细菌分离物的生物质谱,得到每种细菌唯一的肽模式或指纹图谱来鉴定细菌。(2)生物质谱通过对细菌体内蛋白质的分析鉴定细菌的属、种、株。采用PMF方法已对酵母、大肠杆菌等多种微生物的蛋白质组进行了研究。对大肠杆菌经膜转印的蛋白质研究表明,三个肽段即可达到对蛋白质的正确识别。(3)串联质谱还可针对脂类的脂肪酸、糖类组成进行鉴定,也可从单细菌水平发现和确定病原菌及孢子。对特殊脂质成分的分析则可了解样本中病原菌的活力和潜在感染。

Microflex MALDI-TOF质谱仪除了应用于微生物鉴定的检测,今后还可用于科研,只要有相应的数据库,质谱仪更能用于蛋白质组的鉴定、治疗药物的监测甚至司法鉴定等方面,为临床和患者提供更全面的服务。

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